Se encuentra situado en los municipios de Flores, La Libertad, Melchor de Mencos, San Andrés y San José, en el departamento de El Petén. Abarca aproximadamente la mitad del departamento, sobre el paralelo 17. Tiene límites internacionales con México, al oeste y al norte, y con Belice, al este. Se encuentra zonificada en áreas de cinco tipos: áreas núcleo (Parques Nacionales y Biotopos Protegidos), áreas culturales, áreas de usos múltiples, áreas de recuperación y áreas de amortiguamiento. Su flora y su fauna son diversas. La vegetación local está representada por bosques maduros, plantas arbustivas y pastos naturales. El río Escondido forma, en época de lluvias, el humedal de agua dulce más grande de Centroamérica. Debido a sus dimensiones, la Reserva de la Biosfera Maya es un importante refugio de mamíferos mayores, entre ellos venados de cola blanca, tapires, jaguares, pumas, monos araña y monos aulladores; mamíferos menores, como el pizote, el mapache, el tepezcuintlé, infinidad de roedores y murciélagos, así como de aves de presa de gran envergadura y otras de menor tamaño, tanto residentes como migratorias. El lugar que ocupa la Reserva fue el asentamiento de la cultura Maya clásica, por lo que cuenta con una enorme cantidad de sitios arqueológicos, todos ellos de gran importancia, como El Mirador, El Zotz, Piedras Negras, Tikal y Uaxactún. Su extensión permite el intercambio genético de especies que necesitan mucho espacio para vivir. Los sitios y zonas arqueológicas de la cultura Maya le confiere relevancia desde el punto de vista histórico-cultural. Se accede desde Flores, cabecera del departamento de El Petén. Se pueden encontrar hoteles y hospedaje de todas las categorías en Flores, El Remate, las riberas del lago Petén Itzá y dentro del Parque Nacional Tikal. El Instituto Guatemalteco de Turismo, INGUAT, y diversas organizaciones no gubernamentales trabajan conjuntamente para ofrecer servicio de hospedaje, alimentación y visitas guiadas en distintos puntos de la Reserva (Uaxactún y Cruce dos Aguadas) y de su zona de Amortiguamiento (El Remate, Ixlú).

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